Difference between revisions of "Team:Ionis Paris/05 06 16"

 
(15 intermediate revisions by 2 users not shown)
Line 1: Line 1:
 
{{IONIS_HEADER}}   
 
{{IONIS_HEADER}}   
 
<html>  
 
<html>  
−
        <!-- ====Google font==== -->
 
−
        <link href='https://fonts.googleapis.com/css?family=Merriweather:400,700,700italic,400italic,300italic,300' rel='stylesheet' type='text/css'>
 
 
          
 
          
−
        <!-- ====Open Sans==== -->
 
−
        <link href='https://fonts.googleapis.com/css?family=Open+Sans:400,600,700,600italic,400italic,700italic,300,300italic' rel='stylesheet' type='text/css'>
 
  
 
     <!-- Nos feuilles de style -->
 
     <!-- Nos feuilles de style -->
Line 35: Line 31:
 
                             <div class="bloggrid_right">
 
                             <div class="bloggrid_right">
 
                                 <div class="blog_top">
 
                                 <div class="blog_top">
−
                                     <h4 class="blog_topHd">
+
                                     <h2 class="blog_topHd">
−
                                     <font color =”#279AD3”> Competent cells: E.Coli DH5⍺ </font></h4>
+
                                     <font color =”#279AD3”> Competent cells: E.Coli DH5⍺ </font></h2>
−
                                   </div>                                          
+
                                   </div>
−
                                    <h4 class="blog_topHd"><font color = ”#46BB0A ”>Objectives</font></h4>                      
+
 
−
            <p>The objective here is to make a stock of E.Coli DH5⍺ competent cells for subsequent transformations.</p>
+
     
−
                                    <h4 class="blog_topHd"><font color = ”#46BB0A ”>Materials </font></h4>
+
<h3><font color =”94FAF1”> Objectives </font></h3>
 +
 
 +
<p>The objective here is to make a stock of E.Coli DH5⍺ competent cells for subsequent transformations.</p>
 
                                          
 
                                          
−
                                          <h3> < font color = ”#23B7CA”> Stock concentrations: </font> </h3>
+
<h3> <font color =”94FAF1”> Materials </font> </h3>
 +
 
 +
<h5>  <font color =”#3CB5E1”> Stocks concentrations: </font> </h5>
 
                                  
 
                                  
 
                               <li><p>O/N DH5⍺ pre-culture: O/N inoculation of 100 µL DH5⍺ into 100 mL LB.</p>
 
                               <li><p>O/N DH5⍺ pre-culture: O/N inoculation of 100 µL DH5⍺ into 100 mL LB.</p>
Line 51: Line 51:
 
                               </li>
 
                               </li>
  
−
                                             <h4 class="blog_topHd"><font color = ”46BB0A ”>Protocol</font></h4>
+
                                             <h3><font color = ”94FAF1”>Protocol</font></h3>
−
                                           <h3>< font color = ”23B7CA”> Competence:</font></h3>
+
                                           <h5><font color =”#3CB5E1”> Competence:</font></h5>
 
                                
 
                                
 
                         <ol>  <li><p>Inoculation of 3 mL O/N culture in 100 mL LB in 500 mL erlenmeyer.</p>
 
                         <ol>  <li><p>Inoculation of 3 mL O/N culture in 100 mL LB in 500 mL erlenmeyer.</p>
Line 80: Line 80:
  
 
                           </ol>
 
                           </ol>
−
                       <p><font color =”#7F7F7F”>NB: The competency of the prepared cells will be tested the 10/06.</font></p>
+
                       <p><font color ="A6A6A6">NB: The competency of the prepared cells will be tested the 10/06.</font></p>
  
 
                                     <div role="tabpanel" class="tab-pane fade" id="popular_post">
 
                                     <div role="tabpanel" class="tab-pane fade" id="popular_post">
Line 150: Line 150:
 
         <!-- ====END BLOG TABLE==== -->
 
         <!-- ====END BLOG TABLE==== -->
 
          
 
          
 +
 
     <!-- ====START SOCIAL Link==== -->
 
     <!-- ====START SOCIAL Link==== -->
 
     <div class="footer_social">
 
     <div class="footer_social">
Line 224: Line 225:
 
                             </div>
 
                             </div>
 
                         </div>
 
                         </div>
 +
                    <div class="col-lg-3 col-md-3 col-sm-5">
 +
                            <div class="footer_Widgets">
 +
                                <h4>Download the app</h4>
 +
                                <a href="https://itunes.apple.com/us/app/quantifly/id1166875690?ls=1&mt=8"
 +
                                  target="_blank" style="target-new: tab;">
 +
                                    <figure class="widget_gallery">
 +
                                        <div class="RXcircleEffect"></div>
 +
                                        <img src="https://static.igem.org/mediawiki/2016/8/8d/IONIS_IGEM_paris_logo_apple.png"
 +
                                            alt="" />
 +
                                        <figcaption>
 +
                                            <i class="zmdi zmdi-link"></i>
 +
                                        </figcaption>
 +
                                    </figure>
 +
                                </a>
 +
                                <a href="https://play.google.com/store/apps/details?id=fr.plnech.quantifly&hl=en"
 +
                                  target="_blank" style="target-new: tab;">
 +
                                    <figure class="widget_gallery">
 +
                                        <div class="RXcircleEffect"></div>
 +
                                        <img src="https://static.igem.org/mediawiki/2016/6/65/IONIS_IGEM_paris_google_play.png"
 +
                                            alt="" />
 +
                                        <figcaption>
 +
                                            <i class="zmdi zmdi-link"></i>
 +
                                        </figcaption>
 +
                                    </figure>
 +
                                </a>
  
 +
                       
 +
                            </div>
 +
                        </div>
  
 
                     </div>
 
                     </div>

Latest revision as of 20:23, 19 October 2016

Competent cells: E.Coli DH5⍺

Objectives

The objective here is to make a stock of E.Coli DH5⍺ competent cells for subsequent transformations.

Materials

Stocks concentrations:

  • O/N DH5⍺ pre-culture: O/N inoculation of 100 µL DH5⍺ into 100 mL LB.

  • 0.1M CaCl2: prepared the 05/06

  • 0.1M CaCl2/15% Glycerol: prepared the 05/06

    • Protocol

    Competence:

    1. Inoculation of 3 mL O/N culture in 100 mL LB in 500 mL erlenmeyer.

    2. Incubation at 250 rpm at 37°C until the DO 0,6 —> DO = 0.615

    3. Cells were transferred to 3 sterile ice-cold 50 mL Falcon tubes. 20 mL in each falcon tube.

    4. Incubate on ice for 30 min. Do not allow cells to warm up over 4°C.

    5. Spin cells at 4000 rpm for 10 min at 4°C.

    6. Discard supernatant and try to drain all remaining media.

    7. Gently resuspend on 10 mL cold 0.1M CaCl2

    8. Incubate on ice 20 min

    9. Centrifuge 10 min at 4,000 rpm at 4°C

    10. Discard supernatant and gently resuspend on 5 mL cold 0.1M CaCl2/25% Glycerol

    11. Transfer in 1.5 mL eppendorf (100 µL/tube)

    12. Store at -80°C

    NB: The competency of the prepared cells will be tested the 10/06.

    Creative and impressive building

    How you can be a super creative

    World best photographer and photography