Team:BGIC China/protocols/plasmid-extraction

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  • 质粒提取

    1. 将4ml-8ml菌液收集于2ml离心管内,12000rpm离心1min

    2. 加入250ul buffer P1后vortex混匀

    3. 加入250ul buffer P2后上下翻转10次并立即加入350ul buffer P3后上下翻转10次

    4. 12000rpm离心10min

    5. 向CP3柱子内加入500ul buffer BL后12000rpm离心1min

    6. 将步骤4中的上清液转移至CP3柱子内

    7. 12000rpm离心1min后去除废液

    8. 向CP3柱子内加入600ul buffer PW静置2min后12000rpm离心1min,去除废液

    9. 重复步骤8,这次12000rpm离心4min

    10. 将CP3柱子装入1.5ml EP管内放入50℃金属浴锅内开盖挥发5min

    11. 想CP3柱子内加入50ul buffer EB后闭盖放入50℃金属浴锅静置15min

    12. 12000rpm离心3min

  • 耗材来源及信息