Difference between revisions of "Team:Ionis Paris/Protocol 6"

 
Line 177: Line 177:
 
          
 
          
 
   
 
   
−
    <!-- ====START SOCIAL Link==== -->
+
  <!-- ====START SOCIAL Link==== -->
 
     <div class="footer_social">
 
     <div class="footer_social">
 
         <div class="container-fluid">
 
         <div class="container-fluid">
Line 251: Line 251:
 
                             </div>
 
                             </div>
 
                         </div>
 
                         </div>
 +
                    <div class="col-lg-3 col-md-3 col-sm-5">
 +
                            <div class="footer_Widgets">
 +
                                <h4>Download the app</h4>
 +
                                <a href="https://itunes.apple.com/us/app/quantifly/id1166875690?ls=1&mt=8"
 +
                                  target="_blank" style="target-new: tab;">
 +
                                    <figure class="widget_gallery">
 +
                                        <div class="RXcircleEffect"></div>
 +
                                        <img src="https://static.igem.org/mediawiki/2016/8/8d/IONIS_IGEM_paris_logo_apple.png"
 +
                                            alt="" />
 +
                                        <figcaption>
 +
                                            <i class="zmdi zmdi-link"></i>
 +
                                        </figcaption>
 +
                                    </figure>
 +
                                </a>
 +
                                <a href="https://play.google.com/store/apps/details?id=fr.plnech.quantifly&hl=en"
 +
                                  target="_blank" style="target-new: tab;">
 +
                                    <figure class="widget_gallery">
 +
                                        <div class="RXcircleEffect"></div>
 +
                                        <img src="https://static.igem.org/mediawiki/2016/6/65/IONIS_IGEM_paris_google_play.png"
 +
                                            alt="" />
 +
                                        <figcaption>
 +
                                            <i class="zmdi zmdi-link"></i>
 +
                                        </figcaption>
 +
                                    </figure>
 +
                                </a>
  
 +
                       
 +
                            </div>
 +
                        </div>
  
 
                     </div>
 
                     </div>

Latest revision as of 19:52, 19 October 2016

Protocol 6 : E.Coli Dh5α and BL21 transformation (Heat-shock)

Aim: Introduce plasmid DNA in E.Coli bacteria

Thaw a tube of DH5-alpha competent cells on ice for 10 min.
Mix gently and carefully pipette 50 µL of cells into a transformation tube on ice
Add 1-5µL plasmid DNA to the cell mixture (one tube for each ratio)
Carefully flick the tube 4-5 times to mix cells and DNA. Do not vortex.
Place the mixture on ice for 30 min. Do not mix.
Heat shock at exactly 42°C for 45 s. Do not mix.
Place on ice for 5 min. Do not mix.
Pipette 250µL of room temperature SOC into the mixture.
Place at 37°C for 60 min at 250 rpm.
Warm selection plates to 25°C.
Mix the cells by flicking the tube and inverting.
Spread 100µL of cells onto selection plates.
Incubate all the plates O/N at 37°C.

Sources

  • NEB Transformation Protocol

  • Addgene Bacterial Transformation protocol