Team:UrbanTundra Edmonton/Notebook

  • July 20th 2016

    1. 4 microlitres of milliq water with 1 microlitre of plasmid
    2. 5 microlitres of no chlorite dismutase
    3. 1 microlitre of cutsmart buffer (specifically 1.1111 microlitre)
      • a. 10 x cutsmart buffer into tubes makes 1x [ ]
    4. When adding BsaI, only touch the surface of the BsaI to the pipette tip. The reason: has glycerol which is sticky. Take 0.5 microlitre of BsaI.
    5. Mix sample very gently then put into a 37 degrees celsius incubator for 1 hour.
    6. Heat kill at 65 degrees celsius for 20 minutes. This kills the BsaI to prevent star activity.
    7. Pulse down tubes then add 8 microlitre of milliq water.
    8. Add 2 microlitres of T4DNA ligase buffer.
    9. Add 0.5 microlitre of ligase then mix gently and incubate at room temperature for 30 minutes or longer

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